Go Back   Diễn đàn Sinh học Việt Nam > Phòng thí nghiệm > Làm thí nghiệm với protein

Làm thí nghiệm với protein Điện di protein, Western blot, Elisa, sắc ký, khối phổ...

Trả lời
 
Ðiều Chỉnh Xếp Bài
Old 01-08-13, 17:02   #1
lehanh650
Registered Users
 
lehanh650's Avatar
 
Tham gia ngày: Feb 2012
Bài gửi: 3
Thanks: 2
Thanked 1 Time in 1 Post
Chào các bạn
Mình đang làm về beta glucan, đến đoạn thu beta glucan phân tử thấp rồi, nhưng mình chưa biết cách kiểm tra sản phẩm beta glucan phân tử đó, bạn nào biết cách kiểm tra ko? mách mình với, nếu mình điện di SDS thì có được ko các bạn nhỉ? cám ơn cả nhà ạ
lehanh650 is offline   Trả Lời Với Trích Dẫn

Sponsored Links
Old 02-08-13, 09:21   #2
cfareast
Thành viên
 
cfareast's Avatar
 
Tham gia ngày: May 2008
Bài gửi: 132
Thanks: 1
Thanked 39 Times in 34 Posts
Mình chuyên về beta glucan đây.
Bạn làm bglucan nào? có nhiều loại, cellulose cũng là bglucan. Mỗi loại b glucan sẽ có cách nhận diện khác nhau.
Ah, sao mà lại thu phân đoạn thấp?, thấp là bao nhiêu?
SDS chỉ dùng cho protein thôi, các polysacchrides phân tử lớn, nhớt và khó chạy...
Bạn phải tinh sạch, xác định thành phần sugar (HPLC hay TLC), chạy phổ NMR, H1 IR....

Nói tóm lại, làm khó hơn protein.
cfareast is offline   Trả Lời Với Trích Dẫn
Thanked by
Old 02-08-13, 16:07   #3
lehanh650
Registered Users
Thread starter
 
lehanh650's Avatar
 
Tham gia ngày: Feb 2012
Bài gửi: 3
Thanks: 2
Thanked 1 Time in 1 Post
Trích:
Nguyên văn bởi cfareast View Post
Mình chuyên về beta glucan đây.
Bạn làm bglucan nào? có nhiều loại, cellulose cũng là bglucan. Mỗi loại b glucan sẽ có cách nhận diện khác nhau.
Ah, sao mà lại thu phân đoạn thấp?, thấp là bao nhiêu?
SDS chỉ dùng cho protein thôi, các polysacchrides phân tử lớn, nhớt và khó chạy...
Bạn phải tinh sạch, xác định thành phần sugar (HPLC hay TLC), chạy phổ NMR, H1 IR....

Nói tóm lại, làm khó hơn protein.
mình thu hồi beta glucan tổng số từ bã men bia, sau đó sử dụng enzyme beta endoglucanase để cắt, thu các phân tử beta glucan phân tử bé, có kích thước <150 kDa, mình chuyên về sinh học phân tử, mới được tiếp xúc với cái này, nên khó hiểu quá, bạn có cách nào kiểm tra được kích thước phân tử beta glucan phân tử nhỏ như thế ko? mách mình với. hic. cám ơn bạn rất nhiều
lehanh650 is offline   Trả Lời Với Trích Dẫn
Old 02-08-13, 16:18   #4
cfareast
Thành viên
 
cfareast's Avatar
 
Tham gia ngày: May 2008
Bài gửi: 132
Thanks: 1
Thanked 39 Times in 34 Posts
Trích:
Nguyên văn bởi lehanh650 View Post
mình thu hồi beta glucan tổng số từ bã men bia, sau đó sử dụng enzyme beta endoglucanase để cắt, thu các phân tử beta glucan phân tử bé, có kích thước <150 kDa, mình chuyên về sinh học phân tử, mới được tiếp xúc với cái này, nên khó hiểu quá, bạn có cách nào kiểm tra được kích thước phân tử beta glucan phân tử nhỏ như thế ko? mách mình với. hic. cám ơn bạn rất nhiều
beta 1,3 glucan của nấm men là không tan nhé. có thể cắt nhỏ 130Kd thì sẽ tan chút.
Bạn ko thể biết chính xác kích thước phân tử, vì đơn giản là hỗn hợp sau cắt sẽ là 1 dải các bglucan với Mw khác nhau từ vài nghìn tới hàng triệu Da.

Bạn chỉ có thể biết trong hỗn hợp đó, cái Mw nào là chiếm nhiều thôi. Đơn giản nhưng cũng phải mua 1 số hóa chất của hãng...

Mua marker standard cho glucan (5-7 loại glucan).
Mua hạt sephadex hay sepharose, nhưng phải đúng loại.
chạy cột gel, tính toán kích thước theo phương trình hồi quy logarit gì đó.

Nói chung phức tạp hơn là Protein.

ah, endoglucanase phải là 1,3 b glucanase nhé.

Cái này mình cũng làm rất nhiều về cả enzyme lẫn glucan, kinh nghiệm đầy người rồi. Nhưng phải có thiết bị và hóa chất.
cfareast is offline   Trả Lời Với Trích Dẫn
Thanked by
Old 05-08-13, 17:11   #5
lehanh650
Registered Users
Thread starter
 
lehanh650's Avatar
 
Tham gia ngày: Feb 2012
Bài gửi: 3
Thanks: 2
Thanked 1 Time in 1 Post
Trích:
Nguyên văn bởi cfareast View Post
beta 1,3 glucan của nấm men là không tan nhé. có thể cắt nhỏ 130Kd thì sẽ tan chút.
Bạn ko thể biết chính xác kích thước phân tử, vì đơn giản là hỗn hợp sau cắt sẽ là 1 dải các bglucan với Mw khác nhau từ vài nghìn tới hàng triệu Da.

Bạn chỉ có thể biết trong hỗn hợp đó, cái Mw nào là chiếm nhiều thôi. Đơn giản nhưng cũng phải mua 1 số hóa chất của hãng...

Mua marker standard cho glucan (5-7 loại glucan).
Mua hạt sephadex hay sepharose, nhưng phải đúng loại.
chạy cột gel, tính toán kích thước theo phương trình hồi quy logarit gì đó.

Nói chung phức tạp hơn là Protein.

ah, endoglucanase phải là 1,3 b glucanase nhé.

Cái này mình cũng làm rất nhiều về cả enzyme lẫn glucan, kinh nghiệm đầy người rồi. Nhưng phải có thiết bị và hóa chất.
cám ơn bạn nhiều nhé, mình sẽ tìm hiểu thêm từ những gợi ý của bạn
lehanh650 is offline   Trả Lời Với Trích Dẫn
Thanked by
Old 29-09-13, 23:00   #6
hotrennui6686
Registered Users
 
hotrennui6686's Avatar
 
Tham gia ngày: Dec 2012
Bài gửi: 1
Thanks: 2
Thanked 0 Times in 0 Posts
Trích:
Nguyên văn bởi cfareast View Post
Mình chuyên về beta glucan đây.
Bạn làm bglucan nào? có nhiều loại, cellulose cũng là bglucan. Mỗi loại b glucan sẽ có cách nhận diện khác nhau.
Ah, sao mà lại thu phân đoạn thấp?, thấp là bao nhiêu?
SDS chỉ dùng cho protein thôi, các polysacchrides phân tử lớn, nhớt và khó chạy...
Bạn phải tinh sạch, xác định thành phần sugar (HPLC hay TLC), chạy phổ NMR, H1 IR....

Nói tóm lại, làm khó hơn protein.

cho minh hoi, minh muon thu hoi beta glucan tu nam men bia thi nen dung nhung phuong phap nao? bay gio minh moi bat dau tim hieu ve van de nay thoi.
Thanks!
hotrennui6686 is offline   Trả Lời Với Trích Dẫn
Old 30-09-13, 13:26   #7
cfareast
Thành viên
 
cfareast's Avatar
 
Tham gia ngày: May 2008
Bài gửi: 132
Thanks: 1
Thanked 39 Times in 34 Posts
Có nhiều phương pháp khác nhau. Bạn nên vào google mà tìm nhé. Mình có mấy bài publication về tách chiết b-glucan nấm men bia.
cfareast is offline   Trả Lời Với Trích Dẫn
Old 31-10-13, 08:48   #8
whynot2812
Registered Users
 
whynot2812's Avatar
 
Tham gia ngày: Oct 2013
Bài gửi: 1
Thanks: 0
Thanked 0 Times in 0 Posts
Các bạn ơi giải đáp giúp mình với: beta-1,3 glucan và beta-1.6 glucan có cấu trúc tương tự như cellulose, như vậy cellulase có phân hủy được được beta-1,3 glucan và beta-1.6 glucan không? Hiện mình đang dùng 1 sản phẩm trị nấm Candida Albicans, thấy thành phần có cellulase và protease, có công dụng trị nấm từ trong ra ngoài.
whynot2812 is offline   Trả Lời Với Trích Dẫn
Old 31-10-13, 14:45   #9
cfareast
Thành viên
 
cfareast's Avatar
 
Tham gia ngày: May 2008
Bài gửi: 132
Thanks: 1
Thanked 39 Times in 34 Posts
Trích:
Nguyên văn bởi whynot2812 View Post
Các bạn ơi giải đáp giúp mình với: beta-1,3 glucan và beta-1.6 glucan có cấu trúc tương tự như cellulose, như vậy cellulase có phân hủy được được beta-1,3 glucan và beta-1.6 glucan không? Hiện mình đang dùng 1 sản phẩm trị nấm Candida Albicans, thấy thành phần có cellulase và protease, có công dụng trị nấm từ trong ra ngoài.
Làm ơn đọc kỹ phân loại và tính chất của enzyme, cũng như cơ chất.

Câu này dễ và đơn giản quá! Bạn hãy tự tìm hiểu.
cfareast is offline   Trả Lời Với Trích Dẫn
Old 25-03-15, 10:14   #10
ChinSu
Thành viên
 
ChinSu's Avatar
 
Tham gia ngày: Jul 2009
Đến từ: Hanoi
Bài gửi: 13
Thanks: 5
Thanked 0 Times in 0 Posts
Trích:
Nguyên văn bởi cfareast View Post
beta 1,3 glucan của nấm men là không tan nhé. có thể cắt nhỏ 130Kd thì sẽ tan chút.
Bạn ko thể biết chính xác kích thước phân tử, vì đơn giản là hỗn hợp sau cắt sẽ là 1 dải các bglucan với Mw khác nhau từ vài nghìn tới hàng triệu Da.

Bạn chỉ có thể biết trong hỗn hợp đó, cái Mw nào là chiếm nhiều thôi. Đơn giản nhưng cũng phải mua 1 số hóa chất của hãng...

Mua marker standard cho glucan (5-7 loại glucan).
Mua hạt sephadex hay sepharose, nhưng phải đúng loại.
chạy cột gel, tính toán kích thước theo phương trình hồi quy logarit gì đó.

Nói chung phức tạp hơn là Protein.

ah, endoglucanase phải là 1,3 b glucanase nhé.

Cái này mình cũng làm rất nhiều về cả enzyme lẫn glucan, kinh nghiệm đầy người rồi. Nhưng phải có thiết bị và hóa chất.
Bạn ơi, mình cũng đang muốn mua enzyme endo 1,3 beta glucanse mà không biết mua ở chô nào đây. Mình cũng đã tra mạng và hỏi một số công ty cung cấp enzyme thì toàn là beta glucanase, không đặc hiệu. Bạn giới thiệu cho mình chỗ bạn mua được không? Cám ơn bạn nhiều! (nguyenminhthuhn@gmail.com)
ChinSu is offline   Trả Lời Với Trích Dẫn
Trả lời

Ðiều Chỉnh
Xếp Bài

Chuyển đến


vB 3.8.7 Copyright © 2000 - 2018, Jelsoft Enterprises Ltd.