Go Back   Diễn đàn Sinh học Việt Nam > Phòng thí nghiệm > Làm thí nghiệm với acid nucleic

Làm thí nghiệm với acid nucleic Tách chiết, đo OD, điện di, cắt giới hạn, ligation, biến nạp, cloning, blotting...

Trả lời
 
Ðiều Chỉnh Xếp Bài
Old 07-09-15, 18:49   #1
Nguyễn Kim Ngân
Registered Users
 
Nguyễn Kim Ngân's Avatar
 
Tham gia ngày: Jul 2015
Đến từ: Hà Nội
Bài gửi: 3
Thanks: 9
Thanked 0 Times in 0 Posts
Em chào mọi người, em xin được hỏi về phương pháp làm tăng nồng độ DNA thu được sau khi tách chiết, rất mong được mọi người tư vấn ạ.
Chuyện là em đang thực tập tách DNA từ mẫu máu đông, sử dụng bộ kit của QIAGEN; dung dịch em thu được sau khi tách có nồng độ DNA vào khoảng 17-40 ng/ul, nếu như em cần tăng nồng độ đó lên 100 ng/ul thì có khả thi không ạ? Vì thể tích dung dịch tách chiết được còn khá ít (khoảng 100 ul) nên em ko dám cô cạn nữa.
Em xin cảm ơn mọi người nhiều.
Nguyễn Kim Ngân is offline   Trả Lời Với Trích Dẫn

Sponsored Links
Old 11-09-15, 10:50   #2
Asakura Huy
Thành viên
 
Asakura Huy's Avatar
 
Tham gia ngày: Sep 2015
Đến từ: TP.HCM
Bài gửi: 12
Thanks: 0
Thanked 2 Times in 2 Posts
Chào bạn,
Khi sử dụng kit tách chiết, muốn tăng nồng độ DNA, bạn cần giảm thể tích dung dịch Elution buffer xuống, muốn tăng lên 100ng/ul thì bạn giảm xuống khoảng 50ul thử. Còn nếu bạn muốn tăng nồng độ mẫu DNA đã tách chiết rồi thì chỉ còn 1 cách là lập lại quy trình từ bước cho DNA bám cột trở về sau hoặc dùng kit tinh sạch DNA rồi giảm nồng độ Elution buffer. Tuy nhiên, theo mình lập lại quy trình thì cũng mất một lượng DNA nhất định.
Asakura Huy is offline   Trả Lời Với Trích Dẫn
Thanked by
Old 11-09-15, 10:53   #3
chandat
Registered Users
 
chandat's Avatar
 
Tham gia ngày: Sep 2015
Bài gửi: 1
Thanks: 0
Thanked 0 Times in 0 Posts
Hic khó hiểu thế nhỉ :(
chandat is offline   Trả Lời Với Trích Dẫn
Old 11-09-15, 11:00   #4
Asakura Huy
Thành viên
 
Asakura Huy's Avatar
 
Tham gia ngày: Sep 2015
Đến từ: TP.HCM
Bài gửi: 12
Thanks: 0
Thanked 2 Times in 2 Posts
Hi bạn, trước hết bạn xác định thành phần của 1 bộ kit tách chiết trước. Nồng độ DNA cao hay thấp phụ thuộc vào hiệu quả ly giải mẫu và thể tích cuối cùng bạn dùng thu mẫu. Với kit Qiagen thì hiệu quả ly giải mẫu khá tốt nên muốn tăng nồng độ mẫu chỉ còn 1 cách tốt là giảm thể tích dung dịch bạn thu mẫu (Elution buffer). Nếu bạn chưa hiểu về kit tách chiết hay PCR thì có thể gửi email cho mình: asakura.huy@gmail.com.
Asakura Huy is offline   Trả Lời Với Trích Dẫn
Thanked by
Old 30-11-15, 09:55   #5
lovekieu
Thành viên
 
lovekieu's Avatar
 
Tham gia ngày: Oct 2010
Bài gửi: 30
Thanks: 0
Thanked 13 Times in 6 Posts
Sử dụng bộ kít này nhé:
https://www.zymoresearch.com/dna/dna...concentrator-5

Bạn đang có 100ul với nồng độ 17-40 ng/ul thì bạn cô về 10ul sẽ có nồng độ 170-400ng/ul. Hoặc cô về 20ul thì có nồng độ khoảng 85 đến 200ng/ul.

Bộ kit này chỉ rẻ bằng 70% bộ kit của Qiagen thôi.
lovekieu is offline   Trả Lời Với Trích Dẫn
Thanked by
Old 01-05-16, 16:39   #6
Nguyễn Kim Ngân
Registered Users
Thread starter
 
Nguyễn Kim Ngân's Avatar
 
Tham gia ngày: Jul 2015
Đến từ: Hà Nội
Bài gửi: 3
Thanks: 9
Thanked 0 Times in 0 Posts
Em cảm ơn các bác ạ :D
Nguyễn Kim Ngân is offline   Trả Lời Với Trích Dẫn
Old 01-05-16, 16:40   #7
Nguyễn Kim Ngân
Registered Users
Thread starter
 
Nguyễn Kim Ngân's Avatar
 
Tham gia ngày: Jul 2015
Đến từ: Hà Nội
Bài gửi: 3
Thanks: 9
Thanked 0 Times in 0 Posts
Em cảm ơn mọi người ạ :D Hic mãi mới vào lại được post.
Nguyễn Kim Ngân is offline   Trả Lời Với Trích Dẫn
Old 08-11-16, 17:47   #8
lymxymer
Registered Users
 
lymxymer's Avatar
 
Tham gia ngày: Oct 2016
Bài gửi: 5
Thanks: 0
Thanked 0 Times in 0 Posts
Bài viết hay và rất đáng đọc!
lymxymer is offline   Trả Lời Với Trích Dẫn
Trả lời

Ðiều Chỉnh
Xếp Bài

Chuyển đến


vB 3.8.7 Copyright © 2000 - 2018, Jelsoft Enterprises Ltd.