Go Back   Diễn đàn Sinh học Việt Nam > Phòng thí nghiệm > Làm thí nghiệm với protein

Làm thí nghiệm với protein Điện di protein, Western blot, Elisa, sắc ký, khối phổ...

Trả lời
 
Ðiều Chỉnh Xếp Bài
Old 19-01-15, 17:04   #1
saomai491
Registered Users
 
saomai491's Avatar
 
Tham gia ngày: Jan 2015
Bài gửi: 2
Thanks: 0
Thanked 0 Times in 0 Posts
Anh chị có thể giải thích tại sao khi chạy điện di SDS-page, các band không rõ? Làm sao xác định molecule weight protein và sau đó phải làm như thế nào?
Cám ơn anh chị nhiều!
saomai491 is offline   Trả Lời Với Trích Dẫn

Sponsored Links
Old 02-03-15, 14:52   #2
matnapitxi
Registered Users
 
matnapitxi's Avatar
 
Tham gia ngày: Dec 2010
Bài gửi: 1
Thanks: 0
Thanked 0 Times in 0 Posts
1. Em đang điện di protein sds-page, lúc đầu có xuất hiện các vạch, sau đó khi chạy lại thì không thấy có vạch nào. Anh chị cho em hỏi tại sao lại như vậy? Em hỏi thầy em thì thầy nói là có thể không đủ hàm lượng protein. Nhưng sau khi cô đặc mẫu vẫn không thấy có vạch.
2. Em chạy điện di sds-page theo phương pháp của Laemmli (1970), lúc đầu pha stacking gel 3% thì khoảng 15 phút là đông rồi. Còn bây giờ em cũng làm y như công thức mà để 1 tiếng cũng không đông. Anh chị có thể giải thích cho em không?
Đây là công thức pha stacking gel 3% của em:
2.5 ml 4X Stacking Gel Buffer
6.5 ml dH2O
1.0 ml Acrylamide (29:1)
200 microlit 10% APS
20 microlit TEMED
* 4X Stacking Gel Buffer
0.5 M Tris pH 6.8 6.06 g Tris Base
pH to 6.8 with HCl
0.4% SDS 0.4 g SDS
up to 100 ml with dH2O
matnapitxi is offline   Trả Lời Với Trích Dẫn
Old 27-03-15, 20:05   #3
saomai491
Registered Users
Thread starter
 
saomai491's Avatar
 
Tham gia ngày: Jan 2015
Bài gửi: 2
Thanks: 0
Thanked 0 Times in 0 Posts
Giống như thầy bạn nói hàm lượng protein không đủ, bạn thử extract mẫu lại thử xem.
Còn gel không đặc có thể do APS bạn đã pha lâu nên mất hoạt tính, bạn nên pha vừa đủ dùng khi chuẩn bị gel thôi.
bạn thử xem sau. Chúc bạn thành công!
saomai491 is offline   Trả Lời Với Trích Dẫn
Trả lời

Ðiều Chỉnh
Xếp Bài

Chuyển đến


vB 3.8.7 Copyright © 2000 - 2018, Jelsoft Enterprises Ltd.